ХРОМАТОГРАФИЯ

хроматогра́фия (от греч. chrōma, род. падеж chrōmatos — краска, цвет и gráphō — пишу), физико-химический метод разделения смесей, близких по составу и свойствам, основанный на распределении их компонентов между двумя фазами — неподвижной и подвижной, протекающей через неподвижную. При X. вещества берутся в малых количествах (десятые доли миллиграмма), не подвергаются в процессе анализа химическим изменениям. В биологических исследованиях X. применяют, например, для выделения из сложных смесей белков, в том числе ферментов, витаминов, гормонов и других биологически активных веществ, канцерогенных веществ, пигментов; в фармацевтической промышленности — для получения чистых препаратов.

В зависимости от механизма разделения различают следующие виды X.: адсорбционную, распределительную, ионообменную, осадочную, окислительно-восстановительную, адсорбционно-комплексообразовательную, аффинную. Адсорбционная X. основана на избирательной адсорбции отдельных компонентов смеси при её пропускании через колонку, заполненную соответствующим адсорбентом (окись алюминия, силикагель, крахмал и др.). Распределительная X. основана на различном распределении компонентов смеси между двумя несмешивающимися жидкостями, одна из которых (неподвижная) находится в порах твёрдого носителя, а вторую (подвижную) пропускают через колонку с носителем. С помощью этого вида X. разделяют жирные кислоты содержимого рубца. В основе ионообменной X. лежат обменные процессы между подвижными ионами адсорбента (ионита) и ионами (катионами и анионами) электролита, содержащимися в анализируемом растворе. Этот вид X. используют для определения связанного с белками кальция в сыворотке крови, выделения многих ферментов и других белков. Осадочная X. основана на различной растворимости осадков, образуемых компонентами смеси со специальными реактивами, нанесёнными на высокодисперсное вещество. В окислительно-восстановительной X. разделение вещества обусловлено различными скоростями реакций, протекающих между окислителем или восстановителем, содержащихся в колонке, и ионами анализируемого раствора. При адсорбционно-комплексообразовательной X. используют носитель, способный удерживать как комплексо-образующий агент, так и продукты его реакции с катионами металла анализируемой смеси. В аффинной X. компоненты анализируемой смеси разделяются в зависимости от их биологической специфичности к носителю. С учётом сред, в которых проводят разделение, различают газовую, газово-жидкостную и жидкостную Х.; по форме проведения процесса — колоночную, бумажную и тонкослойную. Разновидность X. — гель-хроматография (гель-фильтрация), при которой анализируемые смеси пропускают через сефадексы (производные декстрана). Скорость прохождения веществ через них зависит от молекулярной массы вещества (первыми проходят вещества с большей молекулярной массой). Разделение белков плазмы крови с помощью этого метода применяют в клинической практике.

Литература:
Кармолиев Р. Х., Современные биохимические методы исследования в ветеринарии и зоотехнии, М., 1971.