ВИРУСОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

вирусологи́ческие иссле́дования, комплекс методов исследования, позволяющих распознать этиологию вирусного заболевания и изучить его возбудителя.

Основными этапами В. и. являются выделение вируса от больных и павших животных (взятие, консервирование, пересылка и подготовка материала, заражение им животных, куриных эмбрионов, культуры клеток); титрование вирусов для определения их количества в исследуемых материалах; культивирование вирусов на восприимчивых домашних и лабораторных животных, особенно на развивающихся куриных эмбрионах и культурах тканей (главным образом первичнотрипсинизированных).

С помощью морфологических методов выявляют элементарные тельца, внутриклеточные включения, (например, Бабеша—Негри при бешенстве, Боллингера при оспе птиц). Иммунохимические методы (главным образом метод флуоресцирующих антител) позволяют определить специфический вирусный антиген в заражённых клетках тканевой культуры или органов и тканей инфицированных животных. С помощью серологических методов проводят видовую и группоспецифическую идентификацию вируса и антител в сыворотках переболевших животных. С этой целью используют реакции нейтрализации, РСК, реакцию гемагтлютинации, задержки гемагтлютинации, диффузионной преципитации, торможения гемадсорбции. Реакция нейтрализации позволяет улавливать антигенные различия сходных между собой вирусов даже в пределах одноимённой группы. РСК применяют для обнаружения вирусных антигенов в материалах от больных и павших животных, идентификации выделенного вируса, изучения антигенных связей между различными вирусами и определения антител у переболевших животных. Реакции гемагглютинации и задержки гемагглютинации широко применяют в В. и. для диагностических целей и типирования возбудителей болезни Ньюкасла, гриппа птиц, парагриппа и некоторых аденовирусов; непрямую реакцию гемагглютинации используют для выявления адено- и миксовирусов, хламидий. Реакцией прицепитации в агаре изучают антигенную структуру вирусов, выявляют антитела в сыворотке и антигены в исследуемом материале. Реакцию гемадсорбции применяют для предварительной индикации и титрования вирусов в культуре клеток, особенно тех, которые не вызывают цитопатического действия. Гемадсорбция наступает раньше проявления цитопатогенного действия, поэтому её используют как ранний метод предварительной индикации вирусов. Гемадсорбция островковая (адсорбция эритроцитов на отдельных участках монослоя клеток) типична для гриппа свиней, эпидемического паротита; диффузная (адсорбция эритроцитов на клетках всего монослоя) — для классической чумы кур, болезни Ньюкасла, африканской чумы свиней и др. Методы очистки и концентрации вирусов используют при изучении физических, химических и морфологических свойств вирусов. Фазовые системы, образованные полимерами, используют для концентрации вирусов из больших объёмов вируссодержащих жидкостей, выделения нуклеиновых кислот вирусов. Радиобиологические методы применяют в В. и. для изучения распределения и локализации вирусов (антител) в организме и особенно для изучения процессов онтогенеза вирусов. С помощью электронной микроскопии обнаруживают вирионы в исследуемом материале и специфические конгломераты вирусов и антител (иммунная электронная микроскопия). Иммуноэлектроосмофорез обусловлен одновременным встречным движением в геле агара антигена и антитела в результате разной величины электрического заряда с образованием комплекса антиген — антитело в виде линии преципитации и последующей его денатурацией. Метод применяют при изучении антигенной структуры вируса. Изоэлектрическое фокусирование основано на способности белков переходить в инертное (в отношении электрофоретической подвижности), а затем агрегированное состояние в изоэлектрической точке. Метод применяют для изучения белков вирусов. При иммуноферментативном методе происходит присоединение фермента к антителам с последующим образованием комплекса фермент — антитело — антиген, который выявляют в клетке с помощью цитохимической реакции на фермент (пероксидазу, щелочную и кислую фосфотазу, глюкозооксидазу). Метод используют с диагностической целью для выявления вирусных антигенов в культурах клеток, мазках-отпечатках, криостатных срезах, а также для изучения тонкой структуры антигенов вируса, патогенеза вирусных болезней и др. См. также Вирусоскопия.

Литература:
Тихоненко Т. И., Методические основы биохимии вирусов, М., 1973, с. 152—58; Лабораторная диагностика вирусных и риккетсиозных заболеваний, пер. с англ., ред. Э. Леннет и Н. Шмидт, М., 1974.